大家好，我的工作是牙醫師，同時間在研究所進修齒顎矯正。今天想跟大家分享研究所相關的話題。
進入研究所就讀後，同時在臨床看診與實驗室做研究，發現臨床與研究之間有很大的差異，兩邊在意的東西也很不一樣。
[st-kaiwa2]養細胞聽起來很無趣。。。[/st-kaiwa2]
[st-kaiwa1]細胞實驗的研究有很困難嗎？[/st-kaiwa1]
[st-kaiwa3]該怎麼確認細胞實驗的成效？[/st-kaiwa3]
實驗室的研究對每一個步驟追根究底，有沒有足夠的邏輯性與證據，只要有一點銜接不順的地方，就要想辦法釐清。但是對於臨床醫師來說，比較在意結果有沒有效，能不能用在臨床治療上。
開始做細胞實驗，才發現實驗室比想像中來得複雜與嚴謹。單純只是培養細胞後給一個變數，想知道細胞的分化有沒有不同，就必須細分為好幾個切入點來確認。
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細胞分化的研究
想要知道細胞分化的差異，只要在顯微鏡底下確認細胞數量即可。我做的實驗是觀察細胞（RAW cell）接受低能量雷射照射後的變化，分化出的蝕骨細胞，可以視為矯正牙齒移動的關鍵細胞。
原本以為只要觀察照射後的細胞數量即可，結果細胞實驗比想像中來得複雜。確認數量變化只是最初步的實驗，確認數量的確有變多之後，還要在不同時間點照低能量雷射，包含分化之前與分化之後，確認低能量雷射對蝕骨細胞的影響。
會需要這樣做的原因是，低能量雷射是一個新的變數，在分化之前或許會讓蝕骨細胞的分化變多。但是也要確保，低能量雷射不會讓分化後的蝕骨細胞受到影響。
Real-Time PCR
細胞研究的嚴謹度超乎想像，知道細胞的分化有變多還不夠，還得確認細胞是否真的分化成蝕骨細胞。要仔細確認的原因是，每個細胞在顯微鏡底下長得或許略有不同，卻很難用外觀判斷是哪一種細胞。
為了確認分化後的細胞是什麼，就必須透過PCR來檢測。就像病毒的篩檢一樣，PCR可以檢測出特定的核酸，用在細胞實驗上，就能判斷是哪一種細胞。
但是PCR檢測的步驟很繁瑣，要先從細胞中萃取出RNA，再反轉錄成cDNA，才能進行PCR的檢測。每個步驟都要很小心，因為RNA的結構很不穩定，稍有閃失就會影響實驗結果。
一般實驗使用的純水還不夠，環境中隨處可見的核糖核酸酶(RNAase)都可能讓RNA結構受到影響，因此實驗過程中必須使用特殊的DEPC水來減少RNAase的活性。
經過繁雜的PCR手續，才能檢測出細胞表面標誌，用來判斷實驗分化出來的細胞到底是不是蝕骨細胞。
總結
臨床與研究就像處於兩個不同世界，彼此之間不太了解對方在做什麼。從臨床治療進入實驗室做研究後才發現，待在實驗室雖然不用面對患者的情緒，但是實驗過程其實一點也不簡單。對於不熟悉實驗的我來說，反而比臨床看患者還更辛苦。
臨床與研究雖然在意的地方不太一樣，卻都很需要花時間反複鑽研、比較與整理，才能得到正確的結果。為了從細胞實驗得到嚴謹可靠的結果，每一個實驗步驟都要重複多次，才能確保實驗結果是可被重複、且可信賴的。